氣溶膠噴霧滅菌性能測試艙是針對消毒劑或消毒器械使用噴霧消毒后,對空氣中的氣溶膠噴霧的消毒效果進行開發研究,從而建立企業的檢測方法。下面我們通過六級篩孔空氣撞擊式采樣法進行試驗,建立空氣噴霧消毒效果試驗的檢驗方法。
試驗設備:環儀儀器 20m3氣溶膠噴霧滅菌性能測試艙;過氧化氫消毒機
試驗材料:15% 過氧化氫消毒液、白色葡萄球菌 8032、磷酸鹽緩沖液、中和劑溶液等
試驗儀器:生物安全柜、氣溶膠發生器、六級篩孔撞擊式采樣器等
試驗步驟:
(1)打開兩個 20 m3測試艙的開關,然后設置兩個 20m3測試艙的溫度和相對濕度,其溫度為 22.5 ℃、相對濕度為 60%,然后觀察一定時間,待溫濕度恒定在所調數值左右再進行下一步;
(2)將已加好 15% 過氧化氫消毒液的過氧化氫消毒機、已加好菌懸液的氣溶膠發生器等全部放入測試艙內,并連接好電源,然后將測試艙的門關閉;
(3)打開氣溶膠發生器開關,進行噴霧染菌,同時打開風扇開關,用風扇進行攪拌。噴霧染菌結束后,關閉氣溶膠發生器,風扇繼續攪拌 5 min,最后需要靜置 5 min,確保細菌均勻分布于空氣中。
將兩個氣霧艙分別標記為對照組和試驗組空氣艙,然后用已連接好的六級篩孔撞擊式采樣器(里面裝有NA平板)分別對兩個氣霧室進行采樣。
將采樣氣體管的進氣口放在艙中央離地 1 米高處,然后采樣口連接六級篩孔空氣撞擊式采樣器(裝有 NA 瓊脂平板),按照采樣速度 28. 3 L/min,采樣時間 0. 5 min 進行采樣,分別為消毒處理前對照組和試驗組的陽性對照(即污染菌量),應在 5.0×10^4~5.0×10^6 CFU/m3之間;
(4)用遙控器打開過氧化氫消毒機,點擊“開始”按鈕,讓設備按照 2 mL/m3 進行噴霧15% 過氧化氫消毒液,在試驗空氣艙內進行消毒,對照組空氣艙同時進行相應處理,即將 15% 過氧化氫消毒液更換為無菌水,進行相同的操作;
(5)噴霧結束后,作用 2 h,用已連接好的六級篩孔撞擊式采樣器 (里面裝有含中和劑的 NA 平板) 分別對兩個氣霧室進行采樣,采樣速度為 28. 3 L/min,采樣時間 5 min,對試驗組和對照空氣艙同時進行采樣;
(6)采樣結束后,將所有的平板直接放入(36±1℃)恒溫培養箱中培養 48 h,然后觀察結果,進行菌落計數;
(7)同時設置陰性對照組,即用同批次未用的培養基等同時進行培養。陰性對照組應無菌生長,否則試驗失敗,需更換試劑重新進行試驗;
(8)試驗重復 3 次。
試驗結果:
≥200 mg/L 的硫代硫酸鈉的普通營養瓊脂培養基對白色葡萄球菌有明顯的抑制作用,而在其中添加≥50%D/E中和肉湯后,其抑制作用消失,但只有當其中添加≥2 倍濃度D/E 中和肉湯后,中和劑鑒定試驗結果才滿足評價規定,第 1組~第 3 組菌量在 50 CFU/平板~300 CFU/平板之間,三組間菌落數誤差率不超過 15%,第 4 組無菌生長,且連續 3 次試驗合格。
如有試驗疑問,可以咨詢環儀儀器相關技術人員。